1.準(zhǔn)備工作，胰酶、培養(yǎng)基、PBS各預(yù)熱10-15分鐘
1. 去上清，先用PBS清洗兩次

2.棄PBS后，加入1ml胰酶，前后左右輕輕搖勻后，超凈臺(tái)常溫放置3-5分鐘左右

3.顯微鏡下觀察細(xì)胞，若細(xì)胞變得橢圓透亮后，輕拍細(xì)胞瓶壁

4.顯微鏡下觀察細(xì)胞是否已經(jīng)脫落，要是沒有脫落繼續(xù)消化2分鐘后再輕輕拍打，95%以上細(xì)胞脫落請(qǐng)立即加入含有血清的培養(yǎng)基終止消化

5.將消化下來的細(xì)胞懸液移入離心管離心，正常離心轉(zhuǎn)速：1000-1200轉(zhuǎn)，5分鐘

6.分瓶，第一次傳代建議1：2傳，或者傳代一瓶，凍存一支

1，收到細(xì)胞后穩(wěn)定一小時(shí)后，分兩個(gè)50ml的離心管對(duì)等離心1000轉(zhuǎn)5分鐘

2.棄上清，一管分2個(gè)T25瓶傳代，一管凍存

懸浮細(xì)胞傳代不需要每次都離心操作，建議每傳代2次離心操作一次，以去除細(xì)胞中的碎片

1.收到細(xì)胞穩(wěn)定一小時(shí)后，懸浮細(xì)胞收集離心，貼壁細(xì)胞按照貼壁順序來消化即可