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常用的卵巢癌細胞的培養(yǎng)及細胞表達
發(fā)布時間: 2021-10-09 點擊次數(shù): 4275次整理一篇關(guān)于卵巢癌細胞的培養(yǎng)方法和細胞的特征特點,由于卵巢癌早期缺少癥狀,即使有癥狀也不特異,篩查的作用又有限,因此早期診斷比較困難,就診時60%~70%已為晚期,而晚期病例又療效不佳,卵巢癌方向的研究也成為了目前基礎(chǔ)醫(yī)學實驗研究重點,下面我們分享部分我們實驗室有的卵巢細胞株的培養(yǎng)方法和特征。
部分細胞形態(tài)
CELL Name:NIH OVCAR
Cell Name:SK-OV-3
細胞系 形態(tài)特征 培養(yǎng)基 其他 ID8小鼠卵巢表面上皮細胞 單層,貼壁生長 90%DMEM高糖(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A 雙抗(SD0038)
DMEM*培養(yǎng)基(貨號:MD0101);
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
在C57BL/6小鼠體內(nèi),可導致腹腔腫瘤和腹水的形成;常被用作卵巢癌的同基因小鼠模型 caov-3
人;卵巢腺癌細胞
來源于卵巢組織;上皮細胞樣 90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0200)+SP(SD0008)+G/A (SD0038)
DMEM*培養(yǎng)基(貨號:MD0125)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
Caov-4
人;腺癌
來源于轉(zhuǎn)移部位:輸卵管的漿膜下層;上皮細胞;貼壁 Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入20%胎牛血清FBS CHO
倉鼠;卵巢細胞
90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)
*培養(yǎng)基:F12K*培養(yǎng)基(貨號:MD0401)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
CHO-K1
倉鼠;卵巢細胞亞株
來源于卵巢組織;上皮細胞 90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)
*培養(yǎng)基:F12K*培養(yǎng)基(貨號:MD0401)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)
*凍存液:無血清細胞凍存液 (SD0002)
CHO/dhFr-
倉鼠;卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷
來源于正常卵巢組織;上皮細胞 IMDM培養(yǎng)基加入10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清FBS;添加0.1mM次黃嘌(漂)呤,0.016mM胸腺嘧啶,100nM氨甲喋呤。 該細胞為二氫葉酸還原酶缺陷細胞。 在沒有HT(次黃嘌(漂)呤-胸腺嘧啶)時細胞會死亡。細胞培液中加氨甲喋呤可以防止對藥物低抗性的回變細胞的生長。 CTLA4 Ig-24倉鼠;卵巢細胞 來源于卵巢組織;上皮細胞 90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)
DMEM*培養(yǎng)基(貨號:MD0101)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
ES-2
人;卵巢透明細胞癌
來源于低分化卵巢透明細胞癌組織;成纖維細胞;貼壁;致癌 90%McCOY's 5A(MD0900)+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)
*培養(yǎng)基:McCOY's5A*培養(yǎng)基(貨號:MD0901)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
在裸鼠中成瘤。該細胞對多種化療藥物包括doxorubicin, cisplatin, carmustine, etoposide 和cyanomorpholinodoxorubicin (MRA-CN)表現(xiàn)出低到中等的耐受性。ES-2細胞表達低水平的P糖蛋白。 HEY
人;III期卵巢乳頭狀囊腺癌
來源于子房組織;上皮細胞;貼壁;致癌 90%1640基礎(chǔ)(MD0200) +10%FBS(SD0100)+1%GA(SD0038)
*培養(yǎng)基鏈接:1640*培養(yǎng)基(MD0201)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
HEY細胞系對烷基化劑順二胺二氯鉑(II)(順鉑)表現(xiàn)出一定程度的抗性 HO-8910
人;卵巢癌細胞
來源于卵巢癌病人腹水中;上皮細胞樣 RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),加入10%胎牛血清。 轉(zhuǎn)移到裸鼠中形成的腫瘤集聚與患者原病灶處的形態(tài)一致。 HO-8910PM人;高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞 RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),加入10%胎牛血清。 Lec1
倉鼠;卵巢細胞
來源于卵巢組織;上皮細胞 90%αMEM(MD0804)+10%胎牛血清(SD0100)+肌醇 43.2mg/L(SD0014)+葉酸 8.82mg/L(SD0016)+β-巰基乙醇 7.8mg/L(SD0031)+G/A (SD0038)
*培養(yǎng)基:αMEM*培養(yǎng)基(貨號:MD0807)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C)是從脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑選出來的能抗麥芽凝集素的突變株。Lec1 缺乏稱作GlcNAc-T1的糖基轉(zhuǎn)移酶,從而N-連接碳水化合物被阻斷在Man5GlcNAc2Asn中間體。對于研究N-連接糖基化改變對內(nèi)源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的糖蛋白的功能和區(qū)隔化的影響,這些細胞十分有用。 NIH:OVCAR-3
人;卵巢癌細胞
來源于卵巢腺癌病人惡性腹水;上皮細胞;貼壁;致癌 80%1640(MD0200)+20%胎牛血清(SD0200)+0.01 mg/ml牛胰島素(SD0020)+G/A (SD0038)
*培養(yǎng)基:1640*培養(yǎng)基(貨號:MD0220)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
與107細胞聯(lián)合皮下接種5只裸鼠21天后全部成瘤。NIH-OVCAR-3是研究卵巢癌藥物抗性的一個合適的模型系統(tǒng)且由于存在激素受體,這對于激素治療的評估或許是有用的。 OV-90
人;3級,IIIC期,惡性乳頭狀漿液性腺癌
來源于卵巢癌轉(zhuǎn)移部位:腹水;上皮;貼壁;致癌 42%MCDB 105+42%M 199(MD0950)+15%FBS(SD0200)+1%GA(SD0038)
*培養(yǎng)基:MCDB105/M199*培養(yǎng)基(MD1203)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
致病基因:her2/neu +, p53 (mutated,Ser--> Arg mutation at exon 6, codon 215) Ref
表達角蛋白基因
SK-OV-3
人;卵巢癌細胞
來源于卵巢腺癌,腹水轉(zhuǎn)移;上皮細胞 90%McCOY's 5A(MD0900)+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)
*培養(yǎng)基:McCOY's5A*培養(yǎng)基(貨號:MD0901)
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
此細胞對腫瘤壞死因子和幾種細胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受, SW 626
人;III期腺癌
來源于子房組織;上皮細胞;貼壁;致癌 Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入10%胎牛血清FBS TOV-21G
人;3級,III期,原發(fā)性惡性腺癌; 透明細胞癌
來源于:子房;上皮細胞;貼壁;致癌 含有1.5g / L碳酸氫鈉的MCDB105培養(yǎng)基和含有2.2g / L碳酸氫鈉的199培養(yǎng)基以1:1混合。再加入15%胎牛血清FBS 致病基因:p53 +(野生型)
表達角蛋白基因
UACC-1598
人;4級囊腺癌
來源于子房組織;上皮細胞樣;貼壁 Leibovitz的L-15培養(yǎng)基加入轉(zhuǎn)鐵蛋白0.01 mg / ml;0.01 mg / ml胰島素;5μg/ mL(55 U / ml)過氧化氫酶;3.6μg/ mL(0.01 mM)氫化可(啲)的松;70μg/ mL(0.5mM)鄰磷酸乙醇胺;10 ng / ml人重組表皮生長因子(EGF);3 ng / ml(0.01μM)雌二醇;0.8 ng / ml(1 pM)Na-L-甲狀腺素;額外的2 mM谷氨酰胺和5%胎牛血清FBS 受體表達:低表達表皮細胞生長因子受體
致病基因:表達N-myc, 真核翻譯起始因子5A2(eIF-5A2);低表達c-erbB2; 不表達ras
表達基因:不表達細胞角蛋白(MAK-6),黃體酮,ras;低表達c-erbB2;表達N-myc, 真核翻譯起始因子5A2(eIF-5A2)。
UWB1.289
人;卵巢癌
上皮細胞樣;貼壁 50%的RPMI-1640培養(yǎng)基和50%的MEGM(來自Clonetics / Lonza的乳腺上皮生長培養(yǎng)基(MEGM Bullet Kit; CC-3150)由MEBM基礎(chǔ)培養(yǎng)基和SingleQuot添加劑制成(ATCC不使用慶大霉素 - 兩性霉素B)。加入3%胎牛血清FBS
注意:不要過濾*培養(yǎng)基。
表達致病基因:p53
表達抗體:表達細胞角蛋白7(CK-7),鈣網(wǎng)膜蛋白,Wilms的腫瘤蛋白(WT);不表達BRCA1
表達受體:不表達雌激素和黃體酮
UACC-2727 上皮樣,貼壁 90%L-15(MD1100)+5%FBS(SD0200)+0.01 mg/ml transferrin+0.01 mg/ml insulin+5 µg/mL (55 U/ml) catalase+3.6 µg/mL (0.01 mM) hydrocortisone+70 µg/mL (0.5mM) o-phosphoethanolamine+10 ng/ml human recombinant epidermal growth factor (EGF)+3 ng/ml (0.01 µM) estradiol +0.8 ng/ml (1 pM) Na-L-thyroxine+2 mM glutamine+G/A (SD0038)
定制*培養(yǎng)基:L-15*培養(yǎng)基(貨號:MD0000)
氣相:空氣,100%;二氧化碳,0%。溫度:37攝氏度
凍存條件/Cryopreservation:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
*凍存液:無血清細胞凍存液(SD0002)
her2/neu(+);EGFR(+);N-myc(+)MAK-6(+)