-
科研實驗無小事——細(xì)胞的STR鑒定
發(fā)布時間: 2021-09-29 點擊次數(shù): 1922次做實驗的時候才發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的種類太多,于是我們需要查詢各種文獻看每個細(xì)胞的特征,從而設(shè)計實驗規(guī)劃與步驟,我們在緊湊的實驗種完成了實驗,提交文章的時候,才發(fā)現(xiàn),需要細(xì)胞鑒定。
據(jù)統(tǒng)計約30%細(xì)胞系被交叉污染或錯誤辨識,因使用了交叉污染或錯誤辨識的細(xì)胞而導(dǎo)致研究結(jié)論錯誤、結(jié)果不可重復(fù)、臨床細(xì)胞治療災(zāi)難性后果……這浪費大量時間、精力和金錢。因此NIH、ATCC等機構(gòu)多次發(fā)出呼吁,要求研究者對細(xì)胞進行鑒定,最近美媒報道1/6科學(xué)家在研究使用“假"細(xì)胞,2014年12月、2015年2月Science雜志分別發(fā)表文章專題闡述細(xì)胞交叉污染和錯誤辨識的嚴(yán)重性;2015年4月Nature通知:Nature旗下所有雜志將要求作者鑒定論文中所用細(xì)胞系;2015年6月即有報道稱一科學(xué)家因用錯細(xì)胞系,撤銷Nature論文。NIH、ATCC、Nature和Science等機構(gòu)對此多次發(fā)出呼吁,要求研究者對細(xì)胞進行鑒定,STR基因分型已被作為金標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于細(xì)胞系鑒定,越來越多雜志開始要求投稿人提供細(xì)胞STR鑒定結(jié)果。
在2011年美國就已經(jīng)頒布了細(xì)胞STR鑒定國家標(biāo)準(zhǔn)(ANSI/ATCC ASN-0002-2011)。目前STR檢測已被廣泛應(yīng)用于親子鑒定、個體識別、細(xì)胞來源判定等方面。ATCC、DSMZ、JCRB等國際有名細(xì)胞庫已將STR基因分型列為細(xì)胞鑒定的金標(biāo)準(zhǔn)。
STR鑒定已經(jīng)成為了細(xì)胞株的“ID"能在科研界通行無阻,必須要有STR。那么動物源呢,因為建立的DNA條帶并不完善,目前只有小鼠的部分細(xì)胞可以提供STR。
STR鑒定描述:
利用熒光標(biāo)記擴增產(chǎn)物長度多態(tài)分析方法對細(xì)胞樣本進行9個/16個STR位點進行分型。設(shè)計PCR引物,組成2個PANEL用于擴增多態(tài)位點。位點的熒光標(biāo)記采用引物上標(biāo)記5’FAM熒光標(biāo)記。引物用在線Primer3 軟件設(shè)計。PCR產(chǎn)物稀釋后取少量與內(nèi)標(biāo)標(biāo)記混勻后直接上ABI 3130xl進行毛細(xì)管電泳,數(shù)據(jù)文件用GeneMapper4.0(Appliedbiosystems)來分析。
STR(Short Tandem Repeat,短串聯(lián)重復(fù)序列)是一類廣泛存在于真核生物基因組中的DNA串聯(lián)重復(fù)序列,由于其核心序列重復(fù)次數(shù)存在個體差異多態(tài)性,因此STR也被稱為細(xì)胞的DNA指紋。
-
血清系列
-
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
-
支原體清除
-
細(xì)胞凍存
-
實驗耗材
-
分子試劑
-
細(xì)胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO(東洋紡)
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner(格瑞納)
-
IKA(艾卡)
-
化學(xué)發(fā)光底物(ECL)
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測
-
細(xì)胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細(xì)胞類-實驗耗材
-
原代細(xì)胞
-
植物檢測系列試劑盒
-
SERANA
-
細(xì)胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測系列試劑盒(AKEN)
-
類器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細(xì)胞因子分子
-
生物樣本庫